Sciences et société

Quelles sont les étapes d'une transformation indirecte avec utilisation d'Agrobactéries ?

Le virion de la bactérie intègre son ADN viral dans la cellule hôte, le gène recherché est inséré dans le chromosome de la cellule hôte il y aura production de protéines virales et réplication du matériel génétique puis dégradation du chromosome de l'hôte. La cellule est ensuite lysé libérant de nouveaux virions contenant de l'ADN viral et certains virions contiendront l'ADN du gène recherché, ils seront collectés puis implantés dans les cellules cibles.

Coupure de l'ADN-T du plasmide bactérien avec une enzyme de restriction, insertion du gène recherché puis on relie les 2 ADN avec de l'ADN ligase et enfin insertion du plasmide recombiné dans les cellules végétales pour ensuite régénéner la plante.

Bombardement de cellules végétales par des particules microscopiques de tungstène enrobées d'ADN-T dans lesquels ont été inséré le gène recherché pour y introduire ces mêmes gènes dans les cellules cibles..

Quelles sont les caractéristiques d'une transgénèse ?

Obtention de résultats entre 5 à 7 ans

Obtention de résultats entre 2 à 4 ans

Des résultats relativement assurés

Des résultats plutôt aléatoires, bien qu'il y ait eu des progrès considérables dans les 10 dernières années.

Le gène GFP permet de...

Détecter le niveau de transcription

Faire une détection mais en détruisant le matériel végétal

De modifier les séquences ADN de chromosome si l'on y insére

Faire apparaître des cellules ou des organites en gris

L'electroporation est un procédé qui...

Fonctionne sur les plantes ne pouvant pas se régénerer

Détruit complètement les membranes de chloroplastes et du coup ces-derniers vont se multiplier dans le milieu et le gène cible inséré par la même occasion.

Utilise un polymère pour déstabiliser les membranes.

Nécessite d'ajouter de la cytokinine et de l'auxine dans les milieux où se développent les colonies de protoplastes.

La transgénèse par utilisation de PEG est constitué de 3 milieux différents où se développent les protoplastes dans lesquels ont été insérés le gène recherché, il s'agit de...

Un premier milieu avec des cellules nouricières et de l'agar, puis un avec peu de cytokinines et d'auxines et un dernier avec beaucoup des deux.

Peu de cytokinines et peu d'auxines dans les 3.

Un premier milieu avec de l'agar et des cellules nourricières, un second avec beaucoup de cytokinines et peu d'auxines et un dernier avec peu d'auxines et sans cytokinines. Après on peut les réinplanter en pleine terre.

Dans le cas d'une transgénèse pour ajouter une résistance à un pathogène, la pyrale, chez une plante...

On utilise des agrobactéries

On coupe avec une enzyle de restriction le gène de la toxine cloné puis on sert tous les fragments dans un vecteur ADN-T

Dans le cas d'une transgénèse pour ajouter une résistance au glyphosate, chez une plante...

On insére à partir du vecteur ADN-T un gène de résistance au glyphosate

Les enzymes produisant des acides aminés essentiels à la plante sont inhibés à cause de l'herbicide et on va augmenter leur résistance en les remplaçant par des enzymes de bactéries

Les enzymes atteintes par l'herbicide sont celles qui produisent des acides aminés essentiels et celles impliqués dans la régulation des stomates

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